Диетиламиноэтил целлюлозасы - Diethylaminoethyl cellulose

DEAE-C схемалық құрылымы: оң зарядталған диетиламиноэтанол топтары теріс иондарды байланыстыра алады

Диетиламиноэтил целлюлозасы (DEAE-C) оң зарядталған шайыр жылы қолданылған ионалмасу хроматографиясы, түрі бағаналы хроматография, белоктар мен нуклеин қышқылдарын бөлу және тазарту үшін. Гель матрицалық моншақтар болып табылады туынды бірге диэтиламиноэтанол (DEAE) және теріс зарядталған ақуыздарды немесе нуклеин қышқылдарын матрицаға жабыңыз. Ақуыздар шайырдан еріткіштің тұз концентрациясын жоғарылату немесе ақуыздың зарядын өзгерту үшін ерітіндінің рН-ын өзгерту арқылы бөлінеді.

Дайындық

DEAE-C сілтілік-катализденген реакциясы арқылы синтезделеді целлюлоза (алынған мақта мата ) 2-хлоротриэтиламинмен, төмендегідей суреттелген:[1]

DEAE целлюлозасына дайындық.svg

Түрлері

Жалпы шайырлар

DEAE-C әдетте DE52 және DE53 ретінде сатылады.[2] Бұл шайырлар алдын ала дайындалған[3] целлюлоза алмастырғыштар байланыстырушы орындарға қол жетімділікті арттыру үшін күшті негізгі ортада ісінеді.[4]

DE52 а pKa 11.5.[дәйексөз қажет ] Буферлік ауқымы диетаноламин 8.4-8.8 құрайды, дегенмен DEAE-C диапазоны өндірушілер арасында әр түрлі.[5]

DEAE-D

DEAE-Декстран (DEAE-D) - қолдануға болатын оң зарядталған декстран туындысы вакцина өндіріс, гендік терапия, ақуызды тұрақтандыру, дислипидемия алдын-алу, флокуляциялық агенттер және басқа көптеген қосымшалар.[6] DEAE-D үшін де қолданылады трансфекциялау шетелдік ДНҚ-мен жануарлар жасушалары. Ол трансфекцияға арналған ДНҚ бар ерітіндіге қосылады. Ол теріс зарядталған ДНҚ молекулаларымен байланысады және өзара әрекеттеседі және белгісіз механизм арқылы сіңіруді жүзеге асырады нуклеин қышқылдары ұяшық арқылы. Бұл процедура әртүрлі үшін қолданылатын өтпелі трансфекция үшін өте қолайлы молекулалық биология зерттеу.[7]

Басқа туынды құралдар

DEAE-Sepharose, DEAE-650 және DEAE-Сефадекс әдетте хроматографияда қолданылады.

Ионалмасу хроматографиясы

DEAE-C - әлсіз анионалмастырғыш. Бұл алмасу зарядтары әлсіз айырмашылығы бар ақуыздарды бөлу үшін қолданылады. Барлық анионалмастырғыштар сияқты шайыр теріс зарядтармен өзара әрекеттесетін оң заряд алады. DEAE целлюлозасының оң заряды протонды амин тобына байланысты. Шайырдың протондалғанын және оң зарядталғанын қамтамасыз ету үшін хроматографияны кемінде 2 рН бірліктен төмен жүргізу керек. pKa амин тобы, 10. шайыр мен ақуыз арасындағы байланыстың беріктігі өте тәуелді рН бағандағы диапазон және pI қызығушылық ақуызының. Шайыр әлсіз алмастырғыш, өйткені ол рН мәндерінің көпшілігінде ішінара иондалған және DEAE-C көмегімен тиімді бөліну. хроматография нақты, тар рН ауқымын қажет етеді.[8]

Целлюлоза, декстран, агароза және басқа ерімейтін комплекстерге әсер етпейді, өйткені олар инертті матрицалар түзеді, сондықтан оларды хроматографияда күшті және әлсіз катиондармен және анионалмастырғыштармен жиі шығарады. DEAE-C моншақтарында оттегі атомдарымен ковалентті байланысқан диэтиламиноэтил тізбектері бар D-глюкоза бөлімшелері целлюлоза.

Сондай-ақ қараңыз

Пайдаланылған әдебиеттер

  1. ^ Руссо, Рональд В .; Феррелл, Джеймс К .; Рирдон, Роберт Ф. (1984-06-01). «Диэтиламиноэтил целлюлозасын мақта матасына синтездеу». Өндірістік және инженерлік химия Өнімді зерттеу және әзірлеу. 23 (2): 250–252. дои:10.1021 / i300014a015. ISSN  0196-4321.
  2. ^ «Whatman® анион алмасу целлюлозасы DE52». Сигма-Олдрич. Алынған 11 мамыр 2016.
  3. ^ Реуэни, С .; Сильберштейн, Л .; Шахар, А .; Фриман, Е .; Mizrahi, A. (ақпан 1982). «DE-52 және DE-53 целлюлозалық микро тасушылар: I. Бастапқы және қалыптасқан анкерлікке тәуелді жасушалардың өсуі». In Vitro. 18 (2): 92–98. JSTOR  20170418.
  4. ^ Петерсон, Элберт А .; Собер, Герберт А. (1956). «Ақуыздардың хроматографиясы. I. Целлюлоза ион алмастыратын адсорбенттер». Американдық химия қоғамының журналы. 78 (4): 751–755. дои:10.1021 / ja01585a016. ISSN  0002-7863.
  5. ^ «DEAE және CM Bio-Gel ® A Ion Exchange Gels пайдалану жөніндегі нұсқаулық» (PDF). Bio-Rad. Алынған 11 мамыр 2016.
  6. ^ «DEAE-Dextran» (PDF). GE Life Science. Amersham Bioscience. Архивтелген түпнұсқа (PDF) 2016 жылғы 11 маусымда. Алынған 11 мамыр 2016.
  7. ^ Гулик, Тод (2003). «DEAE-Dextran көмегімен трансфекция». Жасуша биологиясындағы қолданыстағы хаттамалар. 19: 20.4.1–20.4.10. дои:19.1002 / 0471143030.cb2004s19. PMID  18228428.
  8. ^ Нинфа, Александр (2010). Биохимия мен биотехнологияның негізгі зертханалық тәсілдері. Хобокен, NJ: Джон Вили. ISBN  978-0-470-08766-4.