КАЛЮКС - CALUX

Химиялық активтендірілген LUciferase генінің экспрессиясы (CALUX) - лигандқа тәуелді ядролық рецепторларға негізделген биоанализ үлгілерде нақты химиялық заттарды немесе химиялық заттардың кластарын анықтауда қолданылады. Ол а-мен тұрақты түрде өзгертілген өзгертілген ұяшық сызығынан тұрады ДНҚ құрылысы а люцифераза репортер ген рецепторларға тән ДНҚ бақылауымен жауап элементтері ынталандыруы мүмкін транскрипция енгізілген люцифераза ген және жарық шығаратын фермент шығарады, оны оңай өлшеуге болады. ДНҚ реакциясы элементтері анықталғысы келетін химиялық немесе химиялық заттар класы арқылы реттелетін басқа рецепторларды байланыстыратын орындармен қамтамасыз етілуі үшін әр түрлі болуы мүмкін. Осылайша, қызығушылық тудыратын әртүрлі химиялық заттарды анықтау үшін көптеген CALUX биоанализдері жасалды. Көптеген қосымшалар қоршаған ортаға зиянды химиялық заттарды, мысалы, эндокриндік жүйеге әсер ететін заттарды анықтауға бағытталған (қоршаған орта гормондары ).

CALUX - бұл эффектке негізделген скрининг әдісі, өйткені ол жалпы эффекті өлшейді лигандтар (үлгіден) белгілі бір рецепторда болады. Айырмашылығы жоқ химиялық талдау, CALUX осылайша қызығушылық рецепторындағы жалпы белсенділікті өлшей алады. Бұған анықталған және анықталмаған активаторлар (агонистер ) және ингибиторлар (рецепторлардың антагонистері ).

Қолданбалар

Арил көмірсутегі рецепторы (AhR) жауап беретін (AhR-CALUX) биоанализді әдетте анықтау кезінде пайдаланады диоксиндер және диоксинге ұқсас қосылыстар сынама сығындыларында. Ол молекулалық механизмге негізделген AhR ген экспрессиясын белсендіреді.[1]AhR-CALUX зерттеушілер мен компаниялардың бар-жоғын тексергісі келеді диоксиндер және диоксинге ұқсас қосылыстар биологиялық және қоршаған орта матрицаларында, тауарлық және тұтынушылық өнімдерде, олардың қауіпсіздігін және / немесе ластану деңгейін бағалау үшін тамақ пен жемде. [2] AhR-CALUX биоаналының көмегімен сынаманың сығындысындағы диоксинді және онымен байланысты диоксинге ұқсас химиялық заттарды өлшеу газ хроматографиясын қажет ететін химиялық анализге қарағанда едәуір арзан болса да - жоғары ажыратымдылықты масс-спектрометрия (GC-HRMS), ол тек Үлгі сығындысындағы AhR-белсенді диоксиндер мен онымен байланысты диоксинге ұқсас химиялық заттардың жалпы деңгейі және нақты конгенерлерді анықтау кез-келген GC-HRMS талдауын қажет етеді. Сонымен қатар, AhR-нің адам денсаулығы мен ауруларындағы жақында қалыптасқан рөлін ескере отырып, AhR-CALUX биоанализі AhR-активті химиялық заттарды адамның терапевтік дәрілері ретінде анықтау және сипаттау үшін жоғары скринингтік әдіс ретінде кеңінен қолданылады.[3]

Жыныстық гормондар тәрізді белсенділігі бар қоршаған ортадағы химиялық заттар, сонымен қатар, эстрогендік рецепторларға жауап беретін CALUX (ER-CALUX) және андрогендік рецепторларға жауап беретін CALUX (AR-CALUX) сияқты биоанализдер арқылы анықталады.

Әдебиеттер тізімі

  1. ^ Мюрк, А.Ж .; Дж. Леглер; ХАНЫМ. Денисон; Дж.П.Гизи; C. ван де Гюхте; А.Броуэр (1 қыркүйек 1996). «Химиялық активтендірілген люцифераза генінің экспрессиясы (CALUX): шөгінділер мен кеуекті сулардағы ах рецепторлы белсенді қосылыстарға арналған витамино-биологиялық талдау». Іргелі және қолданбалы токсикология. 33 (2): 149–160. дои:10.1006 / faat.1996.0152. PMID  8812260.
  2. ^ Денисон, М.С .; Б. Чжао; Д.С.Бастон; Г.С. Кларк; Х.Мурата; D.-H. Хан (8 тамыз 2004). «Галогенделген диоксиндерді және онымен байланысты химиялық заттарды анықтау және салыстырмалы мөлшерлеу үшін рекомбинантты жасушалық биоанализ жүйелері». Таланта. 63 (5): 1123–1133. дои:10.1016 / j.talanta.2004.05.032. PMID  18969542.
  3. ^ Эссер, С .; Б.П. Лоуренс; Д.Х.Шерр; Г.Х. Пердью; А.Пуга; Р.Баруки; X. Кумул (15 қараша 2018). «Ескі рецептор, жаңа трюктер - Арыл көмірсутектерінің рецепторлары функциясының кеңейіп келе жатқан әлемі. 4-ші AHR жиналысынан есеп, 29⁻31 тамыз 2018 ж. Парижде, Франция». Халықаралық молекулалық ғылымдар журналы. 19 (11): E3603. дои:10.3390 / ijms19113603. PMC  6274973. PMID  30445691.